荧光探针方向或纳米药物涉及共定位的很多，药物进入到了线粒体还是溶酶体等，除了CLSM直观图，还需要进行具体化处理。

荧光共定位分析方法如何做：每次都要百度？ 不光彩，直接上教程。

很多CLSM不具备导出A图最右侧，如何共定位分析？

来求助，Image J

步骤：

（1）File -＞ Open打开需要分析的荧光图片

（2）对于RGB图片，可通过Image -＞ Color -＞ Split channels将各通道分开。如果在拍摄时涉及红绿蓝以外的通道，推荐将各通道分开保存。

无论图像原本有多少通道，ImageJ也只能拆分出红绿蓝三通道。

（3）Image -＞ Stacks -＞ Images to stack，将多幅图像变成图像栈。

（4）选择工具栏中的直线工具（Line）或矩形工具（Rectangluar），选定图像栈中感兴趣的区域，

Analyze＞Plot profile，弹出的图像中，横轴代表线上各像素点，纵轴为各点对应的灰度值；图像代表了灰度的变化趋势。点击live使结果图与图像栈中的图像相对应。对比各通道结果图可以大致了解共定位情况，根据需要可以将数据导出Excel重新绘图。

（5）通过Plot Profile分析的一个好处是可以直观地看到图像拍摄的曝光情况。当图像过曝时，灰度值的峰会超过最大值灰度值255，导致图像顶端变成平的。过曝会导致原本可能存在差异的灰度信息丢失。如果离最大灰度值较远说明曝光过浅，过浅也可能导致信息的丢失。

文章出自：验外实包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/